长链非编码RNA NPPA-AS1通过靶向miR-372-3p调控结直肠癌SW480细胞的增殖和凋亡

2023-02-15 10:50:13
  

目的 探讨长链非编码RNA NPPA-AS1(lncRNA NPPA-AS1)对结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。

方法 选取南方医科大学附属花都医院和湖北医药医药学院附属人民医院2017年1月至2019年1月期间的30对结直肠癌组织及匹配的癌旁组织;将结直肠癌细胞(SW480细胞)进行体外培养并单独或者联合转染pcDNA-3.1 载体(pcDNA)、miRNA抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)、NPPA-AS1过表达载体(pcDNA-NPPA-AS1)、 miR-372-3p 抑制剂(anti-miR-372-3p)、miRNA模拟物阴性对照(miR-NC)和miR-372-3 模拟物(miR-372-3p)以构建pcDNA组、pcDNA-NPPA-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-372-3p组、pcDNA-NPPA-AS1+miR-NC组 和pcDNA-NPPA-AS1+miR-372-3p组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证lncRNA NPPA-AS1和miR-372-3p的表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)比较细胞活力;蛋白质印迹(Western blot)法比较蛋白表达;流式细胞术比较凋亡情况。

结果 结直肠癌的lncRNA NPPA-AS1对比癌旁组织表达更低,但miR-372-3p对比癌旁组织表达更高(P<0.05);过表达lncRNA NPPA-AS1显著降低SW480细胞的活力,使细胞的凋亡率增加,并降低了B淋巴细胞瘤/白血病-2(B-cell lymphoma-2;Bcl-2)和cyclinD1的表达,提高了B淋巴细胞瘤/白血病2相关X蛋白(BCL2-associated x protein;Bax)和p21的表达(P<0.05)。lncRNA NPPA-AS1靶向调控miR-372-3p表达。抑制miR-372-3p显著降低SW480细胞的活力,使细胞的凋亡率增加,并降低了Bcl-2和cyclinD1的表达,提高了Bax和p21的表达(P<0.05)。上调miR-372-3p表达逆转了过表达lncRNA NPPA-AS1对SW480细胞的影响。

结论 过表达lncRNA NPPA-AS1通过靶向下调miR-372-3p表达调控结直肠癌SW480细胞的增殖及凋亡。




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